Aglutinarea (PA) - și legarea de precipitarea microbiană sau alte celule sub acțiunea anticorpilor în prezența unui electrolit. Precipitatul rezultat a fost numit aglutinează.
1. Pentru detectarea anticorpilor în serul pacientului (serodiagnosis).
2. Pentru a determina serovarului fel și izolat de la un pacient a unei culturi pure de agenți patogeni (serotiparea).
reacție Aglutinarea este utilizat pentru detectarea anticorpilor în serul pacienților, cum ar fi febra tifoidă și paratifoidă (reacția Widal), bruceloza (reacția Wright Heddlsona), tularemie, leptospiroza, și alte boli infecțioase precum și pentru determinarea emisă de excitatoare pacient (infecții intestinale , pertussis și colab.). RA este utilizat pentru determinarea grupelor sanguine, Rh - Factor și colab.
Pentru reacția dintre următoarele componente sunt necesare:
1. Antigenul (aglutinogen) ar trebui să fie corpuscular, adică o suspensie de microorganisme vii sau ucise (diagnosticare m), celule roșii din sânge sau alte celule. utilizat în mod tipic o cultură peste noapte de microorganisme cultivate pe agar înclinat. Cultura a fost clătită de 3 - 4 ml soluție izotonică, transferat într-un tub steril, determina densitatea. Suspensia trebuie să fie omogen și poate include până la 3 miliarde. Celulele microbieni per 1 ml. Utilizarea suspensiilor ucise de microbi - diagnosticare - mai ușor de a lucra (pregătirea pentru locul de muncă).
2. Anticorpii (aglutinine) sunt în serul pacientului (pentru serodiagnosis) sau ser de aglutinare (pentru serotiparea). Aglutinarea ser obținut prin imunizarea iepurilor cu bacterii ucise.
Aglutinarea titru seric este cea mai mare de creștere în care să răspundă cu antigenul corespunzător în anumite condiții experimentale.
Aglutinarea seruri pot fi nativ (non-adsorbit) și adsorbit. Diluții de ser native în interacționare mici nu numai cu tipul de microorganisme, care au fost imunizați pe animale pentru a obține ser, dar cu specii înrudite de microorganisme, anticorpi adică. K. Group (anticorpi la microorganisme având un antigene comune) prezente în aceasta. zer nativ utilizat pentru aglutinarea nepliat (pentru serodiagnosis), care ia în considerare nu numai prezența reacției, dar, de asemenea, dinamica de creștere a titrului de anticorpi.
Dacă din grupul extract din zer nativ (adsorbi) prin reacția anticorpilor cu bacteria inrudit grup având antigene ser adsorbit obținute. Zerul adsorbit poate fi monoretseptornymi (sau de tip specific) de anticorp care conține un singur antigen receptor Polyvalent seruri constau din amestecuri de mai multe adsorbit sau seruri neadsorbite. Serul adsorbit utilizat pentru reacția de aglutinare pe sticlă.
Imunizarea animalelor cu bacterii care se deplasează antigenul H obținut ser-aglutinare H conținând anticorp H (de exemplu, H-salmonelloznaya monoretseptornaya aglutinant ser). antigen O-imunizare preparat aglutinare O-ser conținând anticorpi O (de exemplu, gruparea salmonelloznaya ser adsorbit-O aglutinare Cholera ser O-aglutinare). Imunizarea H și O-antigene produce un ser cu anticorpi bispecifici H și O.
Și O-agtlyutininy da aglutinează fină și aglutinele H - krupnohlopchaty sediment.
3. Electrolit - NaCl izotonică (0,9%, preparat în soluție de apă distilată, de clorură de sodiu).
Există două metode de bază pentru stabilirea reacției de aglutinare: o reacție pe sticlă (denumit uneori o valoare estimată sau placă) și reacția dislocat (în eprubete)
reacția de aglutinare Formularea pe sticlă. Pe diapozitiv degresat din sticlă aplicat două picături de ser și o picătură de soluție izotonică de clorură de sodiu. ser aglutinant diagnostic luate la o diluție, care în funcție de titru său este de 1:10, 1:25, 1:50 sau 1: 100. O picătură de ser și o picătură de bucla se face cultura soluție izotonică a microorganismului testat și se amestecă bine. O picătură de clorură de sodiu cu microorganisme - antigen de control, o picătură de microorganisme fără ser - ser de control. Nu efectua cultura cu ser picături cu o picătură în NaCI. Reacția are loc la temperatura camerei, timp de 1-3 minute. Dacă controlul ser rămâne transparent în controlul antigenului observat opacitate uniformă și picătură unde cultura amestecat cu ser apar aglutineze fulgi, rezultatul este considerat pozitiv. Dacă o picătură de ser antigenului si turbiditate uniform, este negativ. Reacția este în mod clar vizibil pe un fundal întunecat.
control 1. antigen
2. Controlul seric