Mediile de cultură utilizate pentru cultivarea microorganismelor, caracteristicile lor generale și compoziția componentelor.
Microorganisme pentru creșterea normală, dezvoltarea și reproducerea necesită un set de nutrienți, substanțe, care să permită menținerea tuturor componentelor structurale și activitatea funcțională a celulelor microbiene. Prin urmare, în general, microbiologie și biotehnologie, în special, progresele în cultivarea microorganismelor sunt determinate în mare măsură de cunoașterea caracteristicilor lor fiziologice și biochimice și selectarea mediilor de cultură.
Mediile de cultură utilizate pentru cultivarea microorganismelor și alocarea lor în cultură pură în prepararea diferitelor metode biotehnologice medicamente microbiene (antibiotice, vaccinuri, aminoacizi, bio-stimulatori, vitamine, etc.) și studiul proprietăților de microbi. Compoziția mediilor de nutrienți microorganismelor și condițiile de cultură determină în mare măsură rezultatele examinării microbiologice.
Pentru a construi o proteine provenite din celule necesare azot, carbon, hidrogen, oxigen. Furnizarea de hidrogen și oxigen se realizează cu apă. Sursele de carbon sunt numeroase și diverse. În primul rând sunt zaharuri, alcooli polihidroxilici și acizi. Carbon este, de asemenea, o componentă a tuturor compușilor organici, inclusiv proteine, peptone, aminoacizi. Prin urmare, compoziția mediilor de cultură, nu sunt necesare surse suplimentare speciale de carbon.
Accentul ar trebui să fie o sursă de azot. Toate mediile nutritiv artificial fabricate independent în laborator, și „(mediile nutritive uscat) central fabricat se bazează pe substanțe care conțin azot sunt, în principal proteine de origine animală ca substrat azotată pentru fabricarea mediilor de cultură. - Carne (preferabil vită) , pește, carne și făină de oase, caseina În unele cazuri, utilizați înlocuitori de carne de înaltă calitate -. deșeuri de carne și produse lactate, placenta, cheaguri de sânge, precum și proteine de drojdie și produ de legume mersul pe jos (soia, mazăre, orz și altele.).
Microbii pentru creșterea și dezvoltarea normală sunt microelementelor necesare - (. Fier, cupru, mangan și altele) cantități mici de anumite metale. Microcelule coenzime participă la formarea prin care compușii complecși sunt hidrolizați la compuși mai simpli și solubili în apă asimilabile de microbi. Substanțe neorganice - sare care conține clor, fosfor, sodiu, potasiu, calciu, magneziu și alte elemente necesare pentru construcția și funcționarea normală a diferitelor structuri ale celulelor microbiene. substanțe de creștere, sau „factori de creștere“, care sunt în principal vitaminele B joaca un important rol stimulente și autoritățile de reglementare ale metabolismului în microorganisme.
un mediu nutritiv sintetic sunt cele care constau din soluții de compuși chimic pure cu precizie set dozaje. Ca sursă de azot, în general, diferiți aminoacizi sau săruri de amoniu.
Consistența mediile nutritive pot fi solide, lichide și semi-lichide. media solidă a fost preparată prin adăugarea de lichid de bază 1.5-2% agar-agar, 0,3-0,4% agar semifluide, care este un complex polizaharid - procesarea produselor tip special de alge și în stare congelată se ataseaza densitate medie. Agar topește la 80-86 ° C și se solidifică la aproximativ 40 ° C În unele cazuri, gelatină (10-15%) a fost utilizat pentru medii de cultură solid. Un astfel de mediu natural, cum ar fi serul sanguin laminate, pliate albușul de ou ei înșiși sunt dense.
Pentru destinația mass-media scop nutritiv sunt împărțite în diagnosticul de bază, electivă și diferențial. Principala preocupare a mediului utilizat pentru cultivarea multor bacterii. În compoziție, acesta a decis să aloce mediu natural sau natural al compoziției incerte și mediile sintetice, care au fost deja menționate mai sus. Mediul de bază utilizat în .mikrobiologii, denumit hidrolizații triptice cazeină, produse din pește, carne și oase, etc. dintr-un mediu lichid care este preparat. - bulion nutritiv dens și - agar nutritiv. Astfel de medii sunt baza pentru prepararea de mai complexe: zahăr, sânge, ser și alte produse alimentare care satisface nevoile de bacterii patogene mai exigente ..
Medii de cultură electiv concepute pentru separarea selectivă și acumularea unui anumit tip de microorganisme în habitatul lor natural din materiale care conțin diferite microflora străine. Crearea elective (pentru anumite microbi) medii de cultură, se bazează pe caracteristicile biologice care disting microorganismele de cele mai multe altele. De exemplu, Staphylococcus creștere selectivă este observată la concentrații mari de clorură de sodiu, Vibrio cholerae - într-un mediu alcalin.
media Differential cultură de diagnostic utilizat pentru diferențierea speciilor individuale sau grupe de microorganisme. Principiul construcției de medii de diagnostic diferential bazat pe faptul că specii de bacterii egale diferă în activități biochimice și au set variat de enzime scindează substraturi incluse în mediul de cultură. Componentele media-diagnostic diferențial sunt: a) mediu de bază care asigură multiplicarea bacteriilor; b) un substrat chimic specific (de exemplu, lactoză în mediu Endo), la care un raport diferit este de diagnostic pentru microorganisme; Indicator de culoare (de exemplu, indicatorul Andred), schimbarea culorii este un indicator al reacției biochimice și prezența acestui sistem enzimatic în microorganism de testare. media-diferențiale de diagnosticare sunt utilizate pe scară largă în teste de diagnostic pentru identificarea bacteriilor.
mediul de reacție. Pentru creșterea diferitelor specii de bacterii necesită un anumit mediu de reacție, care se exprimă prin exponentul concentrației ionilor de hidrogen (pH). Pentru cele mai multe bacterii ajustat pH în 6.8-8.0. Orientând mediul nutritiv poate fi setat standard de reacție cu hârtie indicatoare. In cele mai multe cazuri, pentru producția sa cu ajutorul indicatorului roșu crezol (interval schimbare de culoare, vezi Tabelul 1). Pentru a rafina mediul utilizat pentru măsurarea pH-metru.
nu suficient pentru a instala în mod corespunzător reacția inițială a mediului nutritiv pentru creșterea cu succes a microbilor. creștere Microorganismele care formează în procesul un număr de acizi, ceea ce face mediul de reacție acidă și este o cauză majoră încetare a creșterii. Pentru a evita acest lucru, este necesar să se creeze condiții care să împiedice o schimbare drastică în mediul de reacție. Parțial preveni modificările substanțelor pH azotate prezente în mediu. Cei mai mulți aminoacizi din substrat, proprietatile au tampon mari pentru transport. In prezent, multe din amestecul nutritiv se adaugă un alt amestec tampon fosfat.
Indicatorii care schimba culoarea atunci când piloți schimbarea pH-ului, nu este folosit doar pentru a determina mediul de reacție. Ele sunt, de asemenea, introduse în suporturi speciale, care sunt folosite pentru a identifica proprietățile biochimice ale microbilor. Decolorarea mediului indică formarea de acizi sau baze în activitatea enzimatică a microbilor. Indicatorii cunoscuți de cumpărare o culoare specifică numai cu alcalin sau acid de reacție, sunt incolore din această reacție. De exemplu, un mediu care conține indicatorul Andred își schimbă culoarea roșu intens la pH = 5,3-5,5, în cazul unui mediu alcalinizare devine incolor - la pH = 7,2. Phenolphthalein este incoloră la reacție și culoarea acidă gama câștig de pH 8.3-10.0.
Mai convenabil LED-uri în două culori, având culori diferite în mediu acid și alcalin. Cele mai răspândite indicatori Clark .Au au culori diferite, în mediu acid și alcalin. În medii care conțin astfel de indicatori sunt bine definite tonul de tranziție. În plus, gama de indicatori Clark sensibilitate este foarte larg.