Construcție de medii nutritive pentru microorganisme în creștere
Multe microorganisme nepretențioase, cum ar fi bacteria Escherichia coli), cresc bine pe mediul unei structuri foarte simplu. Un astfel de mediu se numește minimal (sintetic).
Tabelul 2.2. Compoziția mediului de minimal
Uneori, mediul minimal nu este suficient pentru creșterea normală a microorganismelor. În acest caz, compoziția mediului introdus aditivi care stabilesc în prealabil, în care dintre ele are nevoie de microorganisme active. Pentru multe bacterii din sol, un amestec de vitamine, care sunt adăugate într-o cantitate de 2-3 ml la 1000 ml mediu minimal - un astfel de mediu va fi numit un complex (complex).
Tabelul 2.3. amestec de micronutrienți Compozitie
La alocarea microorganismelor din surse naturale adesea necesare pentru a efectua cultivarea, astfel încât celulele sunt multiplicate, de preferință, un anumit tip de microorganism. În aceste cazuri, metoda culturilor de îmbogățire și a propus Vinogradskii Bayerinkom. Pentru astfel de situații de multe ori trebuie să facă un mediu special numit electivă. Cheltuielile câteva pasaje pe termen scurt, într-un astfel de mediu, este posibil să se obțină o cultură pură a microorganismului țintă.
Tehnologia de preparare mediu nutritiv
mediu nutritiv pentru cultivarea microorganismelor trebuie să îndeplinească două cerințe de bază: 1) trebuie să conțină toate componentele necesare pentru creștere; 2) nu trebuie să conțină impurități microorganisme m. E. Trebuie să fie steril.
media de creștere tehnologie de sterilizare include o serie de tehnici diferite. Principalul și cel mai tradițional sterilizare termică este - un mediu de încălzire la temperaturi ridicate, în cazul în care mor majoritatea microorganismelor (Figura 2.6.). Pentru majoritatea microorganismelor este mediu suficient de fierbere (
Fig. 2.6. Diagrama schematică a procesului de preparare și sterilizare termică a mediului nutritiv
De obicei, mediul este încălzit la o temperatură mai ridicată, pentru care încălzirea este realizată la presiune ridicată (3-5 atm;. Presiune pozitivă). Pentru cantități mici de mediu se utilizează autoclave și sterilizarea unor volume mari de procesare media efectuate direct în fermentator „acut“ abur - jet de abur de supraîncălzire, cu o temperatură de 130-140 ° C
Pasteurizarea opțional sterilizarea la căldură. În cazul microorganismelor care formează spori sterilizarea de căldură nu este potrivit ca sporii microbieni au o stabilitate termică extrem de ridicată, deci utilizați metoda pasteurizării, a primit numele de la un om de știință proeminent al jumătatea secolului trecut, Lui Pastera - unul dintre fondatorii microbiologiei moderne.
Esența acestei metode constă în aceea că mediul este încălzit la o temperatură relativ scăzută (
60 C), apoi se răcește și ciclul se repetă de mai multe ori. Microorganisme (formă vegetativă) die și sporii au rămas viabile în aceste condiții. După răcire, mediul sterilizat la temperatura normală de creștere, sporii germinează și bacteriile trec în cultura stadiu vegetativ, și apoi re-încălzire cauzează moartea lor.
Sterilizarea filtrare. De multe ori este necesar să se utilizeze cultura mass-media compoziție complexă care nu poate rezista la sterilizarea la căldură. De exemplu: glucoză la o temperatură ridicată de „caramelizat“ soluție de culoare închisă, din cauza formării produșilor de degradare a polimerului. Este clar că, în astfel de cazuri, este necesar să se utilizeze metode de sterilizare care economisesc potasiul, cum ar fi filtrarea. Filtrarea este, de asemenea, cunoscută încă din momentul Pasteur.
Adesea folosite ca filtre de filtre din porțelan neglazurate (lumânare Shamberlana) Berkefelda filtru utilizat în mod curent (realizat din kiselgur extrudat), placă de azbest, sticlă și filtre cu membrană. Tehnologia modernă permite fabricarea de membrane pentru a produce membrane cu o dimensiune a porilor predeterminată. Sterilizarea prin filtrare este așa-numita tehnologie a proceselor de membrană care nu este utilizată numai pentru sterilizarea, ci și la fracționarea amestecurilor complexe.
Cu toate calitățile pozitive sterilizanți filtrare prin membrane trebuie remarcat și dezavantajele acestei metode, care includ: adeziunea particulelor la membranele, eterogenitatea porilor diametru, porțiunea de retenție a lichidului scump sterilizabil pe membrana în filtrarea volume mici de ea, precum și o posibilă adsorbție selectivă a ionilor ( adesea - cationi) de la volume mici de soluții, umectabilitatea insuficiente sau slabă prin apă și alte membrane.
Alte metode de sterilizare includ iradiere cu lumină UV, cu raze X si raze y. De asemenea, folosind metode chimice, de exemplu, prelucrarea propiolactonă, oxid de etilenă, și altele. Cele mai frecvent utilizate în propiolactonă se adaugă la mediul de cultură preparate la o concentrație de 0,2%. În decurs de două ore la 37 ° C, sunt ucise toate microorganismele. După menținerea mediului în timpul nopții propiolactonă complet hidrolizat, iar mediul devine utilizabil.
LV Timoșenko, MV Chubik