- manuale de instruire pe histologie. Editat de JG Vasilyeva Soloviov AA Gurina OY
Metode pentru producerea de formulări pentru microscopie optică. Metode REZUMAT și microobjects de fixare agenți coloranți.
Obiectul principal al studiului sunt preparate histologice realizate din structuri fixe. Medicamentul poate fi un tampon (de exemplu, un frotiu de sânge, măduvă osoasă, salivă, lichid cefalo-rahidian, etc.), de imprimare (de exemplu, splină, timus, ficat), filmul de țesut (de exemplu, conectarea sau peritoneu, pleură, Pial) , secțiunea subțire. Cel mai frecvent utilizate pentru a studia secțiune sau a corpului de țesut. preparate histologice pot fi studiate fără un tratament special. De exemplu, prepararea unui frotiu de sânge, de imprimare, film sau organ felie poate fi imediat observate la microscop. Dar, din cauza faptului că structurile au un contrast slab, ele nu detectate în microscopie cu lumină convențională și necesită utilizarea de microscop special (contrast de fază, etc). De aceea, preparatele utilizate adesea tratate special.
Procedeu de fabricare a unui preparat pentru lumină histologice și de microscopie electronică cuprinde următoarele etape principale:
1) luarea materialului și fixarea acestuia, 2) material de etanșare, 3) care formează secțiuni, 4) colorarea sau opacifierea felii.
Pentru microscopie optică necesită mai mult de un pas - în concluzie, felii de balsamul sau alt mediu transparent.
Fixarea materialului histologic obținut
acest efect, substanțe chimice și factori fizici care previn distrugerea ulterioară a țesutului obiect, își păstrează structura sa.
Factorii fizici de fixare - congelare (gheață uscată, azot lichid, oxigen, etc.), expunere la temperaturi ridicate, radiații cu raze X. Toți acești factori cauzează moartea bacteriilor și a inactiva enzimele tesuturi proprii, contribuind la conservarea materialului histologic.
ecluze chimice provoca, de asemenea, moartea microbi și enzime proprii țesuturi, stabilizează structura obiectului. Razlichayutprostye și elemente de fixare chimice complexe.
clemelor simple constau dintr-o singură substanță chimică (de exemplu, formalină, un alcool, acid acetic, etc.). Aceste elemente de fixare, cu toate acestea, să conducă la anumite abuzuri materiale structură histologică.
Astfel, formol cauze încrețindu aceasta, reducerea dimensiunii. Acidul acetic, dimpotrivă, provoacă umflarea. Prin urmare, încuietori sofisticate sunt folosite mai frecvent, în care efectele negative ale clemelor simple de nivelat. De exemplu, opritorul FSO este format din 4 părți de formol, alcool 1 parte și 0,3 părți acid acetic. Acest fixativ determină o foarte ușoară structură de obiect schimbare. Există mai multe elemente de fixare complexe și alte.
Colorarea secțiuni (în microscopie optică) sau pulverizarea sărurilor lor metalice (microscopie electronică) sunt folosite pentru a mări contrastul imaginilor structurilor individuale la vizualizarea acestora cu un microscop. metode de colorare a structurilor histologice sunt foarte diverse și sunt selectate conform studiului.
coloranți histologici subdivizate în condiții acide, bazice și neutre. Ca un exemplu, cel mai cunoscut colorant bazic azuriu II, care colorează nuclee violet în culoare și acid colorant - colorație eozina de culoare roz-portocaliu citoplasmă. Structurile de afinitate selectivă pentru anumiți coloranți, datorită compoziției lor chimice și proprietățile fizice. Structura, bine colorare coloranți acizi, numite oxyphilous (acidofile, eozinofil) și se colorează de bază - bazofile. Structurile de detectare ca coloranți acizi și bazici sunt neutrofilie (heterofil).
medicamente pictare sunt de obicei deshidratate în alcooli de creștere a tăriei și să lumineze în xilen, benzen, toluen, sau unele uleiuri. Pentru conservarea pe termen lung a secțiunii histologice deshidratat închisă între un tobogan și un pahar de acoperire în balsamul din Canada sau alte substanțe. preparat histologic Ready poate fi folosit pentru a studia în cadrul micro-
mulțimea de mai mulți ani. Pentru microscopie electronica, secțiunile au fost obținute pe un ultramicrotom, plasat pe un special săruri de contrast grila de mangan, cobalt, etc. Și apoi navigarea pe microscop și fotografiat. Micrografiile sunt obiectul de studiu, împreună cu preparate histologice.