Diagnosticul de laborator al agentului cauzator Ehrlichiosis câini ... .. ................ 15
Dog Erlichioza - o boală transmisibilă febrila, care este agentul cauzal aparține unui grup mare de microorganisme - rickettsii. Rickettsia este numit dupa un microbiolog american, HT Ricketts, agenți patogeni au descoperit Rocky Mountain reperat febra si tifos ucis. Este cunoscut 12 de specii de Rickettsia, aparținând trei genuri: Cowdria, Neorickettsia și Ehrlichia.
Parazitul genul include bacterii intracelulare mici care cresc obligatorii ai în vacuole parasitiform de granulocite, monocite și alte celule mai puțin. Ele sunt trecute printr-un vector de orizontală (căpușe mai puțin trematode). Infectarea Ehrlich apare atunci când sângele intră în organism susceptibil.
Celulele bacteriene Ehrlichia membrană bistratificată limitată, membrana exterioară diferă în diferite specii și grosimea ei pliere. În coaja destul de Ehrlichia peptidoglican, deci fragilă.
câini Ehrlichia primul a devenit cunoscut omenirea dintre bacterii din genul Ehrlichia: în 1935, Donatien și Lestokvard descris E. canis, iar 5 ani mai târziu, Gordon - Anaplasma phagocytophila. Procesul de descoperire a unor noi specii din genul bacteriei Ehrlichia continuă în prezent. El a fost îngreunată de faptul că Parazitul nu sunt în măsură să crească pe medii artificiale în ouă embrionate de pui, și chiar unele tipuri de celule în cultură. Numai prin introducerea unei practici veterinare de PCR și a altor tehnici de diagnostic molecular au o șansă reală de a identifica și diferenția diferitele tipuri care alcătuiesc cursa.
Parazitul și Anaplasma sunt clasificate în funcție de tipul de celule sanguine invaziruemyh - granulocite, limfocite, monocite și trombocite. În conformitate cu acest apel acestea provoacă boala, „granulocite erlihiohom“, „ehrlichiosis monocitară“, „trombocitopenie ciclică“ etc. Dar trebuie remarcat faptul că unele plus Parazitul de tipul principal de celule pot invada, de asemenea, alte celule.
O caracteristică generală a Rickettsia și locul ocupat de Ehrlichia canis printre rickettsii.
bacteriile rickettsii menționate, cu care ele constituie o similitudine în structura, compoziția, natura și metoda de reproducere de partajare. Cu toate acestea, printre bacteriile, rickettsii ocupă o poziție separată, care este determinată de un număr de caracteristici:
- Rickettsia sunt paraziți intracelulari obligatorii ai, spre deosebire de bacterii, ele nu sunt capabile să crească pe un mediu nutritiv convențional, non-celulare;
biologia lor asociată cu parazitismului artropode;
cauzate de boli Rickettsia sunt caracterizate prin caracteristicile clinici si epidemiologie.
Zdrodovsky Golinevich și în timpul 1942-1944 studiate pe microstructura Rickettsia Rickettsia prowazeki folosind colorarea frotiurilor de sânge de pe Romanovsky. Această metodă de vopsire a relevat morfologice de tip 4 rickettsia și prezența boabelor cromatinei colorate diferentiat.
1. rickettsia coccoid (tip a) au forma de elipsoide foarte mici, sau aproximativ aglomerate de formă ovoidală 0,5 microni în diametru, adesea formează diploformy un dumbbell, lanț ocazional și conglomerate rotunjite. Ele pot fi un singur bob sau omogen. Caracterizat printr-o etapă de maximă infecții rickettsii.
2. Rod formă (scurt tip tijă b) Rickettsia, un tije scurte blând de aproximativ 1-1,5 microni în diametru, cu formarea dvuzernistye pol dispus granule asociate blednookrashennoy protoplasmă. Caracteristica bolilor rickettsii într-o etapă care precede vârf de infecție.
3. bacilară (tijă lungă de tip c) rickettsii, sub formă de tijă alungită și, în general, curbate până la 3-4 microni sau formarea de granule de 3-4 dvuzernistye cu un pol situat cereale. Caracteristic pentru rickettsioses perioadei inițiale.
4. fibroasă (tip micelara d) rickettsii, sub formă de filamente lungi, de multe ori mari, curbate complicat care seamănă cu dimensiune spirillae mari de până la 40 microni, mai mnogozernistye, cu o distribuție uniformă de cereale. Caracteristic primele faze ale bolilor rickettsii, cel mai adesea găsit în plămâni.
Cercetatorii au ajuns la concluzia că tipul de bob cu bob, iar cea mai simplă sunt aglomerate de formă ovoidală formă de Rickettsia, care sunt capabile să reproducă propriile lor fel aglomerate de formă ovoidală. În unele cazuri, nu sunt de reproducție aglomerate de formă ovoidală separate și filiale indivizii rămân conectate în mod continuu protoplasmei, rezultatul este o formă de b și c. Aceste forme sunt de asemenea capabile de autoreproducere cu reproducerea lor proprii fel de forme bipolare. Forma D este formată prin nesepararea în timpul formelor de reproducere b și c. Astfel, toate Rickettsia morfológicamente pleomorphism poate fi determinată, ca urmare a creșterii sau a diviziunii fără a le separa în fiica individuale formate cu parazitilor capacitatea de a reproduce formațiuni micelare multicelulare. 1
Clasificare. Conform determinantul Burgi, Ehrlichia canis, agentul cauzator de câini Ehrlichiosis sunt clasificate după cum urmează:
Secțiunea 9 - Rickettsia și Chlamydia
Morfologie și ciclul de viață. E. canis - mică (1-3 um), gram-negativ, bacterie coccoid, parazit în macrofage și monocite câini care circulă. Vectorii sunt căpușele care au E. canis parazit in celulele sanguine, celulele din partea de mijloc a intestinului, și în glandele salivare. In aceste celule, toate etapele de dezvoltare a bacteriilor sunt limitate cu membrana parazitoformnoy a vacuole. Morfogeneza excitatoare constă în transformarea unei corpusculi elementari sau formă coccoid ovală (0,4 m) în corp formă nedefinită INIȚIAL 1-2 microni cu transformarea ulterioară într-un morula - o colonie de microorganisme, care sunt de asemenea numite corpuscle- includere (2-4 microni). Ciclul este completat pe organele elementare de degradare morula.
In afara bacteriei acoperite cu membrane exterioare și interioare, membrana exterioara din Ehrlichia, porțiuni spre deosebire de alți membri ai familiei rickettsii, a îngroșat. Parazitul peretelui celular nu a fost detectat un număr mare de peptidoglican.
Sporii nemișcate și nu formează capsule, substanța nucleară situată în prolix sub formă de granule situate în citoplasmă nucleoid ce s-au găsit o structură granulară
proprietăți tinctoriale. Capacitatea de a fi colorat cu coloranți de anilină în E. canis este aceeași cu cea a celorlalți membri ai ordine Rickettsiales. Colorate Gram roșu. Ca Rickettsia coccoid, E. canis Romanovsky Giemsa-colorat în diferite nuanțe de albastru, în care cromatinei cadrul de incluziune cu obicei diferențiată tentă roșiatică cromatină. Potrivit Zdrodovsky Rickettsia în frotiuri de sânge colorate rosu rubin culoare, și elementele celulare ale celulei gazdă - în albastru (protoplasme) sau albastru (nuclee) de culoare. 4
Proprietățile culturale. Patogen E. canis nu crește pe medii artificiale, dar se multiplică în culturile de celule. Pentru reproducerea folosind culturi primare de monocite și macrofage, câine, umane epiteliale și o serie de alte culturi celulare. Agentul poate fi izolat prin cultivarea leucocitele obținute de la toate animalele suspectate de a fi infectate.
Mediul de menținere pentru culturile de celule agent trebuie să conțină cel puțin 10% ser fetal de vițel și glutamină infectate. Temperatura optimă a culturilor de incubare infectate cu E. canis este 34-37 0 C.
De asemenea, pentru cultivarea monocite câini folosind mediu Eagle suplimentat cu ser de câine 20% la 37 0 C. 5
Proprietățile biochimice. Ca și alte Ehrlichia, E. canis este un aerobă obligatorii, incapabil de carbohidrați fermentația și au nevoie de o sursă externă de ATP. Activitatea metabolică maximă a expune într-un mediu acid.
Bacteria prezintă o sensibilitate ridicată la doxiciclină, oxitetraciclina, minociclina, cloramfenicol, baytrilu și, într-o mai mică măsură, la aminoglicozide. acidul nalidixic și eritromicină nu au un bactericid pronunțat sau un efect inhibitor asupra E. canis.
gena E. canis este prost inteleasa, dimensiunea sa este de aproximativ 1 Mill. perechi de bază. Acesta a stabilit prezența a cinci gene care codifică sinteza proteinelor membranei exterioare.
Sursele de infecție în sălbăticie sunt lupi, șacali, vulpi. Printre animalele susceptibile E. canis este circulat printr-un vector, care servesc ca căpușele. Vector infectate atunci când sug sângele animalelor infectate, hemocite patogen este transferat la glandele salivare unde se multiplică în mod activ. Mai târziu, în timpul atacului de pe acarieni de câini sănătoși ea infecta prin salivă care conține E. canis. Patogen își păstrează vitalitatea în corpul căpușei în timpul celor 5 luni care permite persoanelor infectate cu acarieni overwinter în toamnă și să treacă infecția la câini deja în primăvara devreme. Există o posibilitate de infecție prin transfuzii de sânge de la un animal bolnav de sănătate, astfel încât nu este nevoie de screening-ul atentă pentru infectarea animalelor donatoare în zonele endemice, Erlichioza, având în vedere că este posibil să scurgeri cronice.
Agentul cauzal este capabil de a provoca infecții la câini de diferite rase, vârstă și sex. Se presupune prezența unei predispoziții genetice la susceptibilitatea la câini anumitor rase: Doberman, Greyhound, ciobanesc german, Hound - ei au boala este mult mai greu și mai des se termină cu moartea.
Severitatea bolii poate afecta patogenitatea unei tulpini a agentului patogen, infectarea doza, statusul imun al animalului și prezența competitive căpușe, precum și infecții secundare și boli invazive.
Agentul cauzal al corpului, în plus față de celulele sanguine gasite in maduva osoasa si splina, precum și alte organe parenchimatoase - oriunde hemoragie apar.
Imunitatea nesteril, patogen gasit in sange de mai mult de un an. Anticorpii IgM și IgA la E. caniș la câini detectate pe 7-a zi, zi 21th apar imunoglobuline din clasa IgG. 11
Obiectivul principal pentru anticorpi specifici sunt antigene cu E. canis Mias 21-160 kD, în care titrul de anticorpi este cea mai mare la proteinele agent Mias 27-30 kD. Proteina de suprafață majoră a E. canis cu Mias 30 kD determină răspuns imun umoral intens la câini și oferă reacții încrucișate cu proteinele membranei exterioare ale Ehrlichia alte specii.
tulpini patogene prezintă antigenic imunitate heterogenitate shtammospetsifichen: rezistența la reinfectarea tulpina omoloagă a agentului patogen este mai mare decât o rezistență la o tulpină heterologă.
Material pentru studiu. Pentru diagnosticul in vivo este trimis la sânge de laborator dintr-o venă și căpușele colectate de la animale. În unele cazuri, există încălcări ale funcției de reproducere, inclusiv avortul, nașterea unor pui, neviabil estru prelungit cu eliberare abundente de sânge. În astfel de cazuri, laboratorul a trimis fat avortat sau scurgeri vaginale.
La animalele moarte au prezentat hemoragie în țesutul subcutanat, iar cele mai multe organe interne, din care afectează mai frecvent măduva osoasă (de obicei în boli cronice), splina, plămânii, sistemul nervos central (sangerare la nivelul creierului), inimă, stomac, tractul gastrointestinal și urogenital mod. Material patologica pentru diagnosticul de laborator este luat din aceste organe.
Biologics. Un tratament specific și măsurile preventive nu sunt dezvoltate.