Aglutinarea - o încleiere și precipitarea microbi sau alte celule sub acțiunea anticorpilor în prezența unei (soluție izotonică de clorură de sodiu) electrolit. Grupuri de bacterii lipit (celule) este numit aglutina. Următoarele componente sunt necesare pentru reacția de aglutinare:
1. Anticorpi (aglutinine) care sunt situate în serul pacientului sau animal imun.
2. Antigenul - suspensie de bacterii vii sau ucise, celule roșii din sânge sau alte celule.
3. Un izotonice (0,9%) soluție de clorură de sodiu.
Aglutinarea de reacție este utilizat pentru serodiagnosis de febra tifoidă și paratifoidă (reacția Widal) cu bruceloză (Heddlsona Wright reacție), tularemie, etc. Anticorp în acest caz este un ser pacient si antigen cunoscut microb. Atunci când se identifică microbi sau alt antigen celular serveste lor suspensie si anticorpi - ser cunoscut imun. Această reacție este larg utilizat pentru diagnosticarea infecțiilor intestinale, pertussis, etc ..
Stabilirea metodelor de RA
RA estimat pe sticla
Nepliat pe RA sticla (seroidentifikatsiya)
testul de aglutinare pe sticlă. Pe diapozitiv degresat din sticlă aplicat două picături de ser specific (adsorbit) și o picătură de soluție izotonică de clorură de sodiu. ser neadsorbite pre-diluat 1: 5 - 1: 100. Picături pe sticla trebuie aplicată astfel încât să existe o distanță între ele. Cultura a fost pipetată sau bucla triturează pe sticlă, și apoi introdus într-o picătură de soluție izotonică de clorură de sodiu, și o picătură de ser, în fiecare agitare până la o suspensie omogenă. O picătură de ser, care nu a fost adus cultura este controlul ser.
Atenție! Nu efectuați cultura într-o picătură de soluție de ser de clorură de sodiu izotonică, care este controlul antigenului. Reacția are loc la temperatura camerei, timp de 1-3 minute. Dacă controlul ser rămâne transparent la antigen de control se observă turbiditatea uniform și în picătura, unde cultura este amestecat cu ser aglutineze fulgi apar pe un fond de lichid transparent, rezultatul este considerat ca reacție pozitivă.
Soluție de cultură fără ser + + Cultura
aglutinarea (metoda volumetrică) reacția Desfasurat. Se prepară ser succesive, adesea de două ori diluat. Metoda se numește surround. Pentru a determina titrul anticorpilor în tuburi de ser 6 take. Primul tub de turnare 1 ml din diluția 1:50 de ser și în toate 6 tuburi umple pipeta gradat de 1 ml de soluție salină. Primul tub obține o diluție a serului de 1: 100 în 2 ml volum. De la 1 ml din primul tub la a doua inserție de tub unde diluare devine 1: 200. Deci numărul de serie de diluții în primele 5 tuburi (1: 100, 1: 200, 1: 400, 1: 800, 1: 1600). Din a cincea tuburi de 1 ml se toarnă într-o soluție dezinfectantă. In toate cele 6 eprubete se adaugă 2 picături de kit de diagnosticare. Al șaselea Flaconul este controlul culturii, deoarece conține numai soluție salină și kit de diagnosticare.
Un astfel de control este necesară pentru a evita cultura aglutinare spontană. Tuburile au fost agitate și plasate în termostat la 37 ° C timp de 2 ore, și apoi a fost lăsat să stea la temperatura camerei peste noapte, după care rezultatele contabile ale reacției de aglutinare. La setarea aglutinare cu seruri de la copii în timpul primelor luni de viață datorită deficienței funcționale a anticorpului necesară pentru a identifica titruri mai mici de anticorpi, care este inclus în ser diluat. Diluția serică inițială ia 01:25. Primul tub a fost preparat 1:50 diluție, urmat de 1: 100, etc.
În cazul în care un rezultat pozitiv în reacția tuburi celule skleevshiesya vizibile sub formă de granule sau fulgi pe un fond de lichid transparent. Aglutinează soluționează treptat la fund ca „umbrela“ și supernatantul devine transparent. antigen de control uniform lăptoasă.
Prin natura sedimentului distinge (fulgi) aglutinare fin și grosier. aglutinarea cu granulație fină se obține atunci când se utilizează O-seruri. Coarse - prin reacția cu flagelat bacterii motile H seruri. Este mai rapid cu granulație fină, rezultând un precipitat este foarte slab și ușor de spart.
Intensitatea reacției este exprimată după cum urmează:
++++ toate celulele s-au stabilit, lichidul din tubul este complet transparent. Rezultatul este brusc reacție pozitivă;
+++ sedimenta mai puțin, nu există nici un lichid complet iluminare. Rezultat reacție pozitivă;
++ precipită chiar lichid mai puțin tulbure. reacție rezultat discutabil;
în partea de jos a tubului cu o ușoară sediment, lichid tulbure. rezultat Dubios reacției;
- sedimente, turbiditate lichid uniform, atât în antigenul de control. Reacțiile negative au ca rezultat