Glutaraldehidei - dialdehidă reacționează cu grupări amino, grupări sulfhidril, și, eventual, cu structuri ciclice aromatice. „“ Molecule Sshivaet „“ mai puternic decât formaldehidă, în legătură cu acest mai preferat ?? en pentru imunohistochimie. Capturile pe baza GA pătrunde încet în țesutul decât formol, deoarece acest lucru poate provoca artefacte pe baza difuziei proteinelor solubile și perturbarea structurii.
Studiile microscopice moderne folosind o varietate de elemente de fixare pe baza obiectivelor studiului.
Deci, după ce ne fixăm proba, impregnat cu o soluție apoasă a dispozitivului de reținere. Pentru turnarea de parafină, care nu se amesteca cu apa, aveți nevoie pentru a scăpa de apă și se înmoaie proba în parafină. Pentru aceasta deshidratare este efectuată într-un eșantion de concentrații crescătoare de soluții de etanol (30% la absolut), apoi menținut în amestec alcool absolut cu xilen sau izopropil (butil) alcool și apoi -sa xilen, parafină cu xilen, și în final incluse în parafină ?? e. Impregnarea parafină efectuată la 56C. Proba fierbinte este plasată într-o matriță și se toarnă încălzită parafină. După întărire, proba este montat pe suport și unitatea este gata de tăiere. Trebuie să ținem cont de faptul că pentru ?? intacte histologice nu s fiecare parafină adecvat, are propriile sale caracteristici de preparare a acestuia. Calitatea calității secțiuni de parafină depinde în mare măsură.
Pentru materialul de cablare este strâns vase ce pot fi închise pentru a evita evaporarea soluțiilor. În cablare manuală modele de schimbare de soluție în soluție, iar cablajul este clasat pe baza valorii de probe de la zile la săptămâni. In laboratoarele folosesc de obicei o diferite mașini de modificare în cazul în care rotația are loc vasele, ĸᴏᴛᴏᴩᴏᴇ asigură agitarea lichidului. timp electrică este redus la o singură zi. Există scheme de cablare accelerate.
blocuri de parafină Ready pot fi stocate pe termen nelimitat. secțiuni în parafină au fost preparate pe un microtom cu un oțel sau (mai rar) o sticlă tăieturi cuțit grosime depinde de proprietățile blocului de parafină, țesut și modelul microtom și calificarea angajaților. Aceasta din urmă are o valoare suficient de mare. In cel mai bun caz, grosimea feliei de parafină de aproximativ 3 microni, care permite să vadă un singur strat de celule în felie. În practică, de obicei, preparate felii de 5-8 mm grosime. Secțiunile au fost plasate pe o lamă de sticlă, ĸᴏᴛᴏᴩᴏᴇ trebuie acoperite cu adeziv, de obicei - ovalbumina. Este necesar ca reducerile nu vor cădea atunci când pictura.
secțiuni de parafină pe sticla pot fi stocate de ani de zile, dar, de obicei, ele sunt vopsite într-o zi sau două după fabricație. Înainte de vopsire a firului din spate de cablare procedura - deparafinare. Acest lucru este de a se asigura că celulele au fost din nou permeabile, iar structurile lor sunt accesibile pentru vopsirea ?? ei. Deparafinare se efectuează în ordine inversă: mai întâi dizolvat în xilen, parafină, secțiunile au fost apoi plasate succesiv în soluții de reducerea concentrațiilor de etanol de până la 30%, apoi - în apă distilată. Secțiunile au fost pregătite pentru colorare.
Colorare produc introducerea manuală de sticlă în soluții de diferite substanțe chimice, sau prin aplicarea de soluții de colorare pe pipetă de sticlă. Există automate pentru secțiuni de vopsire, dar funcționarea lor trebuie să fie foarte costisitoare, pentru că aveți nevoie pentru a umple cantități mari de colorant s ??, care sunt de obicei scumpe. Colorarea secțiuni de parafină relevă o largă varietate de componente și structura celulei. Există o mare varietate de vopsea ?? s, cu posibilitatea de a vopsi structurile celulare și țesuturi. Un progres semnificativ în colorarea secțiunilor histologice a fost făcută în aplicarea în practică a colorantului anilină s ??.
Cea mai comună metodă de vopsire a preparatelor histologice de definire a domeniului, atunci când văzut Sun ?? lea tipuri de celule este colorarea cu hematoxilină și eozină.
În plus față de turnare ceara este folosit pentru a umple celloidin și polietilen glicol, în care utilizarea altor schema de cablaj. Gelatina este turnat piese fără deshidratare, imediat după fixarea.
Metodele histochimie vizează detectarea anumitor molecule în celule și țesuturi, care permite studierea tipurilor de celule specializate de modificari in sanatate si boala. Există mai multe metode histochimice, multe - mai multe etape foarte complexe, și consumatoare de timp.
1. alcool metilic.
2. soluție de HCI 3N.
3. Reactiv Schiff.