Prin curba de calibrare, concentrația substanței în soluția de testat. Pentru aceasta, o soluție a substanței prin aceeași metodă utilizată pentru soluțiile standard pentru prepararea unei curbe de calibrare. Este necesar să se respecte cu strictețe numărul și ordinea de adăugare a reactivilor. Soluția se prepară într-un balon cotat de aceeași mărime. Măsurători efectuate pe dispozitiv după același interval de timp după prepararea soluției colorate, ca o măsurătoare în construcția curbei de calibrare. În unele cazuri (de exemplu, în determinarea amoniacului folosind reactiv Nessler) limitele trebuie să fie precis conta timpul scurs după prepararea soluției colorate. Soluția a fost turnată în aceeași celulă, pentru care este construită curba de calibrare, și incluzând același filtru, se determină densitatea optică a soluției. Apoi, există concentrația analitului corespunzătoare unei densități optice dată. Curba de calibrare este verificată des.
La efectuarea reacției de culoare și curba de calibrare este necesar să ne amintim următoarele:
1. Măsurarea absorbției trebuie efectuată în reacție suplimentară pentru spectrul de culori. Astfel, atunci când reacția devine o soluție galbenă, este necesar să se măsoare absorbția acestei soluții de lumină albastră, adică, selectați lungimea de undă dorită sau un filtru adecvat.
2. Examinați reacția de culoare este cel mai bine la maximul de absorbție - faptul că cea mai mare sensibilitate este atins. În cazul în care poziția maximă este necunoscută, ar trebui definit. Aceste măsuri de precauție asigură rezultate de bună calitate, chiar și în dispozitiv de sensibilitate scăzută.
3. În soluție de control de celule trebuie să conțină toate componentele, cu excepția substanței de testat.
4. Soluția de control trebuie să fie pregătită cu atenție, deoarece pe ea depinde obținerea unor rezultate corecte.
5. Dacă relația este liniară, pentru a obține o curbă de calibrare bună necesită cel puțin cinci puncte. ei trebuie să fie pentru curba neliniare este mult mai mare. Construcția elimină un punct curbă, a cărui absorbție este primită în mod eronat.
6. Măsurarea concentrației necesare pentru a efectua cel puțin trei ori și curba aplicată tuturor valorilor, mai degrabă decât valoarea lor medie. Această metodă de construcție demonstrează acuratețea determinării concentrației curbei de calibrare obținută. In plus, aceasta permite detectarea imediată + măsurători anormale la deviația lor puternică de pe curba. Figura arată etapele de construire a unei curbe de calibrare.
7. Curbele de calibrare obținute cu loturi diferite de reactivi nu sunt, de obicei la fel. Prin urmare, când se schimbă curba de calibrare reactiv trebuie să treci peste.
8. Cea mai bună curbă desenată pe toate punctele experimentale nu trebuie neapărat să treacă prin zero. Acest lucru se datorează faptului că pentru soluția de control absorbant, este practic imposibil să se obțină exact același raport de componente ca un eșantion.