Metoda microscopică pentru dizenterie nu este utilizată din cauza asemănării morfologice dintre shigella și alte enterobacterii.
Metoda bacteriologică este principala metodă de diagnosticare a dizenteriei în laborator. materialzasevayut Analizate asupra mediului și Endo Ploskireva în vase Petri, precum și mediu selenitovuyu pentru stocarea, prin care 16 până la 18 ore se însămânțări pe respectivul mediu nutritiv solid. Plantele sunt cultivate într-un termostat la 37 ° C timp de 18 până la 24 de ore.
În cea de-a doua zi, este studiat caracterul coloniilor. Coloana shigell netedă, fără lactoză, negativă, este transferată într-unul dintre mediile de policarbohidrați (Olkenitsky, Russell, Kligler) pentru a acumula o cultură pură. În a treia zi, se ține seama de caracterul creșterii pe un mediu policarbohidrat, iar materialul este transferat la medii diferențiale (Gissa, etc.) pentru identificarea biochimică a culturii izolate. Determină structura antigenică a culturii izolate cu ajutorul OPA, cu scopul de a se identifica până la niveluri de specii și serovare. În a 4-a zi, se ține seama de rezultatele activității biochimice (Tabelul 14).
Tabelul 14. Proprietățile biochimice ale shigella
Denumiri: "k" - fermentarea substratului cu formarea acidului, "+" - prezența unui semn, "-" - absența unei caracteristici, "±" - un semn nepermanent.
Shigella, spre deosebire de Escherichia, microorganismele sunt fixe, ele nu fermentează lactoza, glucoza se descompune fără generarea de gaz fără lizină decarboxilat. Pentru serotipizare mai întâi pus RA pe sticla cu un amestec de seruri împotriva pre-posedând în zonă și variante de specii de Shigella, apoi RA-sticlă monoretseptornymi viewporturile seruri. Se determină, de asemenea, sensibilitatea culturii izolate la bacteriofagul de dizenterie polivalentă și la antibiotice. Cu scopul epidemiologic determina shigella izolate de fagovar și colicinovar. Una dintre proprietățile shigellai este capacitatea lor de a provoca keratită la cobai (test keratoconjunctival)
Metoda serologică. Pentru detectarea anticorpilor din sânge a pacienților dizenterie (de obicei, sub formă cronică) utilizat Phragmites cu eritrocit km diagnosticums shigelloza. titruri de diagnostic: pentru adulti Shigella Flexner - 1: 400, pentru copii până la 3 ani - 1: 100, la copii mai mari de 3 ani - 1: 200, la restul Shigella - 1: 200. Reacția este de obicei repetată cu serul de sânge luat cel puțin 7 zile; valoarea diagnosticului este titrul de anticorpi crescut de patru sau mai multe ori.
Metode rapide pentru dizenterie - RIF directe și indirecte, co-aglutinarea reacție, ELISA, RNGA anticorp cu diagnosticum eritrocitar pentru detectarea rapidă a Shigella în materialul (de obicei în fecale) și PCR.
Activitatea independentă a studenților
1. Să studieze principalele etape ale distingerii culturii pure de shigell. Luați în considerare culturile pe mediul Ploskirev, Levin, Olkenitsky (demonstrație). Marchează prezența coloniilor incolore la lactoză pe mediile lui Ploskirev și Levin.
2. Monitorizați puritatea culturii shigella izolate. Din mediul lui Olkenitsky, pregătiți un frotiu, colorați-l în funcție de Gram și microscopie. Promikroskopirovat și schiță de monstratsionnye agenți droguri de dizenterie Sh.dysenteriae, Sh.flexneri, Sh.sonnei - bacili Gram negativ, cu muchii rotunjite;
3. Identificarea culturii Shigella izolate:
· Proprietăți antigenice - producerea si evidenta RA pe sticla cu un amestec de specii de seroaglutinare Sh.dysenteriae, Sh.flexneri, Sh.boydii, Sh. sonnei și cultu-roy, alocate pe mediul Olkenipsky. Contabilizarea RA pe sticlă cu seruri de dizenterie specifice;
· Privind proprietățile enzimatice - luând în considerare activitatea biochimică și fagoliza culturii Shigella izolate (demonstrație).
4. Colicinogenotiparea. Luați în considerare proba prin definirea coliciogenotipului culturii izolate (demonstrație). Tehnica producerii este descrisă în secțiunea "Genetica microorganismelor".
5. Determinați sensibilitatea culturii izolate la antibiotice utilizând metoda discului de hârtie (demonstrație).
6. Să studieze produsele biologice utilizate pentru diagnosticarea, tratamentul și prevenirea dizenteriei bacteriene și a holerei:
Aglutinarea serurilor adsorbite la Shigella Sh.dysenteriae, Sh.flexneri, Sh.boydii, Sh.sonnei. Folosit pentru a seta reacția de aglutinare la identificarea Shigella.
Bacteriofagul dysenteric tabletat. Se utilizează pentru prevenirea și tratarea dizenteriei.
· Diagnosticarea eritrocitelor de la Shigella Flexner și Sonne. Folosit pentru setarea RNGA pentru serodiagnosticul di-zenteriei.
Vaccinul pentru dizenterie SHIEGELLVAK, de la Shigella Lipopolysaccharide Sonne.